Anfang Dezember, ein paar Leute in der Stadt Wuhan in der Hubei Provinz in China begann zu fallen krank, nachdem Sie zu einem lokalen Meeresfrüchte-Markt. Sie erlebt Symptome wie Husten, Fieber und Kurzatmigkeit und sogar Komplikationen im Zusammenhang mit akuten respiratorischen distress-Syndrom (ARDS). Die unmittelbare Diagnose war Lungenentzündung, aber die genaue Ursache ungeklärt. Was verursacht diese neuen Ausbruch? Ist es das schwere akute respiratorische Syndrom (SARS)-CoV? Ist es das Middle East respiratory syndrome (MERS)-CoV?
Wie es sich herausstellt, Wissenschaftler übernommen hatte, eine Studie zu identifizieren, die das virus im Dezember nach der Analyse der ersten Fälle. Diese Studie ist jetzt veröffentlicht in Chinese Medical Journal und die Identität des virus wurde etabliert—es ist ein völlig neues virus, das eng mit dem Fledermaus-SARS-wie CoV. Dr. Jianwei Wang (Chinese Academy of Medical Sciences, Institute of Pathogen Biology), führen Forscher auf der Studie, erklärt,“Unser Papier hat die Identität der Fledermaus-CoV Herkunft war unbekannt, bis jetzt.“
In dieser Studie, die Wissenschaftler aus renommierten Forschungsinstituten in China, wie die Chinese Academy of Medical Sciences, Institute of Pathogen Biology, China-Japan Friendship Hospital und Peking Union Medical College, die gemeinsam entdeckt und identifiziert den neuen CoV—die Hauptschuld an der Wuhan-Ausbruch—von next generation sequencing (NGS). Sie konzentrieren sich auf fünf Patienten in Jin Yin tan-Krankenhaus in Wuhan, von denen die meisten waren Arbeiter in der Huanan Meeresfrüchte-Markt in Wuhan. Diese Patienten hatten hohes Fieber, Husten und andere Symptome, und waren zunächst diagnostiziert eine Lungenentzündung, aber von einer unbekannten Ursache. Einige Patienten‘ Zustand rapide verschlechtert zu ARDS; einer starb sogar. Dr. Wang sagt, „Brust x-Strahlen des Patienten zeigte sich eine dunstige Trübung und Konsolidierungen, die typisch für eine Lungenentzündung. Jedoch wollten wir herausfinden, was die Ursache der Lungenentzündung, und die nachfolgenden Experimente ergaben die genauen Ursache—ein neuer CoV-das war nicht bekannt vor.“
Für die Studie nutzten die Wissenschaftler bronchoalveoläre lavage (BAL) fluid-Proben, die Patienten entnommen wurden (BAL ist ein Verfahren, bei dem sterile Flüssigkeit übertragen wird in die Lunge durch ein Bronchoskop gesammelt und anschließend für die Analyse).
Erste, der Wissenschaftler versucht, zu identifizieren, die das virus durch die Genom-Sequenzierung mit NGS-Technologie. NGS ist die bevorzugte screening-Methode zur Identifizierung von unbekannten Erregern, weil es schnell erkennt und Regeln aller bekannten pathogenen Mikroorganismen in der Probe. Basierend auf der Sequenzierung von DNA/RNA aus BAL-Flüssigkeit Proben, die die Wissenschaftler fanden, dass die meisten der viralen liest gehörte zu den CoV-Familie. Die Wissenschaftler montierten das anders „liest“ das gehörte zu CoVs und konstruierte eine ganze Genom-Sequenz des neuen virus; diese Sequenzen wurden zu 99,8-99,9% ähnlich wie unter allen Patienten-Proben, die bestätigt, dass dieser virus war der häufigste Erreger bei allen Patienten.
Weitere, mittels Homologie-Analyse, wo ein Genom-Sequenz ist im Vergleich gegen andere bekannte Genom-Sequenzen (mit einer vorgegebenen Schwelle von 90% des für es als eine „neue“ Folge), Sie bestätigte, dass die Genom-Sequenz dieses neuen virus ist 79.0% ähnlich wie das SARS-CoV, über 51.8% ähnlich zu der MERS-CoV, und über 87.6-87.7% ähnlich zu anderen SARS-ähnliche CoVs aus der chinesischen Hufeisen-Fledermäuse (genannt ZC45 und ZXC21). Die phylogenetische Analyse zeigte, dass die Sequenzen der fünf CoV Stämme erhalten wurden, am nächsten denen von Fledermaus-abgeleitete Stämme, sondern gebildet separaten evolutionären Zweige. Diese Ergebnisse eindeutig vermuten, dass das virus ursprünglich aus Fledermäusen. Dr. Wang-Staaten“, Denn die ähnlichkeiten der viralen replikase-Gens mit allen anderen bekannten „ähnlichen“ Viren sind immer noch weniger als 90%, und auch unter Berücksichtigung der phylogenetischen Analyse-Ergebnisse, man bedenkt, dass dies ist tatsächlich eine neue, bisher unbekannte CoV. Dieses neue virus ist vorübergehend genannt 2019-nCoV.“
Schließlich werden die Wissenschaftler gingen zu ‚isolieren‘, das virus aus der BAL-Flüssigkeit Proben überprüfen, ob die fluid-Proben zeigten cytopathic effect zu Zelllinien im Labor. Die Zellen ausgesetzt die Flüssigkeit Proben beobachtet wurden, die unter dem Elektronenmikroskop, und die Wissenschaftler fanden charakteristische CoV-ähnliche Strukturen. Sie auch verwendet werden, für die immunfluoreszenz—eine Technik, die verwendet spezifische Antikörper markiert mit fluoreszierenden Farbstoffen. Für diese, Sie verwendet serum von Rekonvaleszenten Patienten (die enthaltenen Antikörper), die reagiert mit der viralen Partikel innerhalb der Zellen; dies bestätigt, dass dieses virus tatsächlich die Ursache der Infektion.